PCS-i220A/B柱后衍生儀在15藥典測定中應用

　　測量方法：
 

　　本法系用液相色譜法(通則0512)測定藥材、飲片及制劑中的毒素(以毒素B1、毒素B2、毒素G1，毒素G2總量計)，除另有規定外，按下列方法測定。
 

　　液相色譜儀器構成：
 

　　等度液相色譜儀(高壓輸液泵一臺、熒光檢測器一臺、柱溫箱一臺、進樣器1件、色譜柱一根等)
 

　　柱后衍生儀：PCS-i220A/B

 

　　色譜柱：PC C18 4.6×150mm，5μm
 

　　高速離心機：離心速度4000轉/分鐘以上
 

　　溶劑過濾器
 

　　超聲波清洗器
 

　　固相萃取儀
 

　　免疫親和柱
 

　　分析天平：萬分之一
 

　　均質器(高速攪拌器)：攪拌速度大于11000轉/分鐘
 

　　試劑
 

　　甲醇：色譜純
 

　　乙腈：色譜純
 

　　0.05%的碘溶液
 

　　超純水
 

　　毒素B1.毒素B2、毒素G1、毒素G2對照品
 

　　色譜條件
 

　　檢測器：熒光檢測器
 

　　色譜柱：PC C18 4.6×150mm，5μm
 

　　流動相：甲醇-乙腈-水(40∶18∶42)
 

　　流速：1.0ml/min
 

　　柱溫：40℃
 

　　衍生溶液：0.05%的碘溶液(取碘0.5g，加入甲醇100ml使溶解，用水稀釋至1000ml制成)
 

　　衍生化泵流速：0.2ml/min
 

　　衍生化溫度:70℃
 

　　激發波長λex=360nm(或365nm)，發射波長λem=450nm
 

　　混合對照品溶液的制備
 

　　精密量取毒素混合標準品(毒素B1、毒素B2、毒素G1、毒素G2標示濃度分別為1.0μg/ml、0.3μg/ml、1.0μg/ml、0.3μg/m1)0.5ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，作為儲備液。精密量取儲備液1ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，即得。
 

　　供試品溶液的制備
 

　　取供試品粉末約15g(過二號篩)，精密稱定，加入氯化鈉3g，置于均質瓶中，精密加入70%甲醇溶液75ml，高速攪拌2分鐘(攪拌速度大于11000轉/分鐘)，離心5分鐘(離心速度4000轉/分鐘)，精密量取上清液15ml，置50ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，量取續濾液20.0ml，通過免疫親合柱，流速每分鐘3ml，用水20ml洗脫，洗脫液棄去，使空氣進入柱子，將水擠出柱子，再用適量甲醇洗脫，收集洗脫液，置2ml量瓶中，并用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
 

　　測定方法
 

　　精密吸取上述混合對照品溶液20μl，注入液相色譜儀，測定峰面積。另精密吸取上述供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，測定峰面積，計算出終結果。
 

　　毒素B1、B2、G1、G2對照品色譜圖：

 

　　以上是使用PCS-i220A/B柱后衍生儀 結果基線平穩 峰型窄 檢出限低 檢測準確 *方法要求。